首页>>细胞生物学>>细胞凋亡与细胞周期>>APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒
APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒
  • 产品货号:
    BN16030
  • 中文名称:
    APC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒
  • 货号

    产品规格

    售价

    备注

  • BN16030-50T

    50T

    ¥1200.00

  • BN16030-100T

    100T

    ¥1800.00

产品内容:

                  image.png

储存条件 

     4℃避光冷藏,请勿冻存。有效期见外包装。

光谱特性
     Annexin V-APC: Ex/Em = 650/660 nm 

     PI: Ex/Em=535nm/617nm(with DNA)

产品介绍 

     Annexin V-APC/PI 细胞凋亡检测试剂盒是用红色荧光染料 APC(Allophycocyanin)标记的 Annexin V 作为探针, 来检测细胞早期凋亡的发生,PI 用来检测晚期凋亡细胞或者坏死细胞。因此将 Annexin V-APC 与 PI 联合使用时,可以区分出早凋与晚凋细胞。可用流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。

使用方法 

     1. 根据实验要求诱导细胞凋亡。检测样品中应包含未经处理的细胞样品,作为阴性对照。此外,设定一组凋亡处理的样品做单染,用于调节补偿。

     2. 收集细胞 悬浮细胞:1000 rpm,离心 5 min 收集细胞;贴壁细胞:用不含 EDTA 的胰酶消化后 1000 rpm,离心 5min 收集细胞,胰酶消化时间不宜过长,以防引起假阳性。 对于特定的细胞,如果细胞无法完全离心至管底,可以适当 延长离心时间或稍稍加大离心力。此外,需小心吸除上清, 可以残留约 50 μL 左右的培养液,以避免吸走细胞。 

注:用胰蛋白酶消化然后使细胞在最佳细胞培养条件和培养 基中恢复约 30 min,然后再染色,从而避免假阳性。

     3. 加入约 1 mL 4℃预冷的 PBS,重悬细胞,再次离心沉淀 细胞,小心吸除上清。

     4. 用 1×结合缓冲液重悬细胞,调节其浓度为 1-5×10^6/mL。 

     5. 取 100 μL 的细胞悬液于 5 mL 流式管中,加入 5 μL Annexin V-APC 和 5 μL PI ,混匀后室温避光孵育 10-15 分钟(推荐额外准备两管凋亡细胞,每管中只加入一种染 料:Annexin V-APC 或 PI,用于流式单染的补偿调节)。 

     6. 加入 400 μL 1× Annexin V 结合缓冲液,混匀,进行流式 检测。Annexin V-APC 由 633 nm 激发,选择 FL4 或 RL1 通道检测,PI 由 488 nm 激发,选择 FL3 或 BL3 通道检测。

注意事项: 

     1. 荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

     2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。