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肌原纤维蛋白(MP)分离缓冲液
  • 产品货号:
    BN24949
  • 中文名称:
    肌原纤维蛋白(MP)分离缓冲液
  • 货号

    产品规格

    售价

    备注

  • BN24949-100ml

    100ml

    ¥200.00

    保存温度:RT

  • BN24949-500m1

    500m1

    ¥260.00

    保存温度:RT

肌原纤维蛋白(MP)分离缓冲液主要成分为:磷酸盐,氯化钠,氯化镁和EGTA等。

本产品主要用于从肌肉中提取肌原纤维蛋白。RT可储存一年。


肌原纤维蛋白的提取方法(方法仅供参考):

1、100g新鲜的牛里脊肉剔除可见脂肪组织后,将肉切成小块,然后绞碎。

2、加入200mL的50mM PBS PH7.0(货号BN20527),并用组织捣碎机匀浆1min。

3、将匀浆液在4℃、6000g下离心20min。

4、上清液用四层纱布过滤,得到SP(肌浆蛋白),留下的沉淀用于提取MP(肌原纤维蛋白)。

5、将上述剩余的沉淀用4倍体积(V/W)的肌原纤维蛋白分离缓冲液,在组织捣碎机中搅拌1min(4次,每次持续15s)。

6、得到的匀浆液在4℃、2000g下离心15min后,弃去上清液。再重复上述匀浆和离心步骤2次。

7、然后用0.1M氯化钠替代分离缓冲液洗涤肌原纤维沉淀,经历上述相同的匀浆和离心步骤3次。

8、将最后一次的匀浆液先通过四层纱布过滤以去除结缔组织,再用0.1 M HCI调节PH值至6.25,然后离心(2000g,15 min,4℃),弃掉上清液,剩下的膏状沉淀即为MP。

整个提取过程都在4℃下进行。将分离出的肌肉蛋白在冰上保存,24小时内使用。采用双缩脲法测定蛋白浓度,SP用50mM PBS(pH7.0)稀释,MP用含0.6 M NaCI的50mM PBS (pH7.0)稀释至所需浓度并过夜水合。